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  液质联用手艺正在自然产品折柳中的使用_医学_上等熏陶_熏陶专区。液质联用手艺正在自然产品折柳中的使用 摘要:本文综述了液质联用手艺的成长情景,及其构成、特色、和仪器分类,并 且总结了它正在自然药物因素如黄酮类,生物碱,萜类,香豆素类因素折柳明白中 的使用。 症结词:液

  液质联用手艺正在自然产品折柳中的使用 摘要:本文综述了液质联用手艺的成长情景,及其构成、特色、和仪器分类,并 且总结了它正在自然药物因素如黄酮类,生物碱,萜类,香豆素类因素折柳明白中 的使用。 症结词:液质联用;自然产品;折柳 小引 20 世纪 80 年代,质谱手艺的成长发作了大的奔腾,涌现了良众软电离手艺, 如疾原子轰击电离子源(FAB),基质辅助激光解吸电离源(MALDI),电喷雾电离 源(ESI),大气压化学电离源(APCI)。APCI 电离源的上风正在于明白弱极性或中等 极性的小分子化合物,可是不适合大分子研讨,重要使用于境况检测和药物明白 等研讨范畴。 ESI 实用于中等极性到强极性的化合物,可用于明白正在溶液中能 事先酿成离子的化合物和获取众个质子的卵白质、肽等大分子化合物。这两种离 子源都具备使溶液气化、样品电离等本质,告捷地治理了液相色谱和质谱之间的 接口题目,使得液质联用手艺慢慢成长成为一种成熟的手艺[1]。液质联用(LC/MS) 是指液相色谱与质谱串联的手艺。HPLC 是目前折柳繁复系统最为有用的明白工 具, 因为自然药物中含有机闭、本质差异的众种繁复因素,况且有用因素的含 量往往较低,所以为了深切研讨和开荒自然药物,务必从繁复的中草药组分中提 取、折柳审定出有活性的单体纯样,因为液质联用仪器自愿化、普及化水平愈来 愈高, 已成为中药明白最常用的仪器之一[2]。 1 液质联用的特色 1.1 液质联用仪器的构成 液质联用仪是由 HPLC、接口装备、及 MS 三大单位构成。个中接口装备是 症结。API 接口是目前商品化 LC-MS 仪采用最广的接口,重要网罗电喷雾电离 0/7 (ESI),离子喷雾电离(ISI)和大气压化学电离(APCI)三种操作形式。电喷雾电 离及大气压化学电离接口是一项适用、高效的常压“软”离子化手艺,具有离子 化效劳高、离子化形式众样、可测定高分子量卵白质和热不服稳化合物、易与大 流量 HPLC 联机运用等利益,被人们称为 LC-MS 手艺以致质谱手艺的革命性突 破[3]。 1.2 液质联用明白的特色 液质联用明白样品的前治理经过简化,使样品明白更方便。对流速和滚动相 有必然的央求,滚动相应运用纯水及色谱纯级试剂,个中禁止运用任何无机酸、 卤酸盐、硫酸盐、磷酸盐等无机酸金属盐、皮相活性剂及其它弗成热剖判为气体 的化合物,可运用甲酸、乙酸、甲酸铵、乙酸铵、碳酸氢铵、氨水,慎用氧氟酸。 滚动相中有需要运用挥发性盐时,其浓度应负责正在 20mM 以内,酸则负责正在 0.1% 以内[4]。HPLC-MS 明白举行的症结是液相色谱明白办法的成立及质谱明白条目 的优化。质谱明白条目的优化则要按照目的化合物的分子量及机闭、贯串样品浓 度、基质特色及滚动相构成,调动质谱扫描边界,优化众级碎裂电压。 1.3 常用的液质联用仪器 遵从质谱检测器举行分类,目前比拟常用的 HPLC-MS/MS 仪器睹外 1。 2 自然药物 自然产品为我邦经济成长与人类强健方面作出了巨大功勋。中邦现存最早的 药学专著《神农本草经》,明朝李时珍编著的《本草纲目》以及清代赵敏学编著 的《本草纲目拾遗》就纪录了大宗的自然药物。正在我邦,自然药物又被称之为中 草药,它与中医沿途组成了中华民族文明的宝物,是全人类的贵重资产。自然药 物之因而也许防病治病,是由于基于其物质根源的有用化学因素起到了症结作 用。因为当今全邦邦际化历程加快,咱们的中药要走向邦际商场就务必对其因素 举行准绳性研讨,这就务必借助新颖化仪器,而液质联用仪器即是个中的一种, 正在自然药物因素如黄酮类,生物碱,萜类,香豆素类因素的折柳明白中饰演了极 其紧张的脚色。 1/7 外 1 常用的液质联用仪器 质谱检测器 单级四级杆质谱仪 三重串联四极杆质谱仪 四极离子阱质谱仪 四极杆-飞翔时分质谱仪 傅里叶变换质谱仪 实用边界和特色 实用于基质中无化学布景搅扰的定性、定量明白, 可通过离子源内 CID 具有使离子诱导裂解实行“准 MS/MS”成效,只可获得低诀别率的质料数 可通过其 MS/MS 成效举行定性明白或用选取响应监 测(SRM)形式举行定量明白。正在一齐的质谱明白仪 中,QMS 定量明白结果具体切度和严紧度最好。 适合于目的化合物、肤及卵白质的机闭解析及确认, 但其定量明白才气正在动态边界及平稳度上皆不如四 级杆质谱 贯串四级杆质谱的高圆活度和 TOF 的高诀别率。 高圆活度、高精度、高诀别率,正在测定化合物时可 以确切天生分子式,供应牢靠的审定结果 2.1 黄酮类 黄酮类化合物广博散布于植物界,并具有较强的生物活性, 比如抗菌效率、 遏抑癌细胞的孕育或抗癌效率、解痉挛效率和消浸血压效率等[5]。黄酮类化合物 不仅正在医药上有着广博的使用况且正在寻常存在当中可行动成效食物增添剂、自然 氧化剂、自然色素和甜味剂等。因为黄酮类化合物紧张的药用价钱和保健效率, 看待繁复自然产品中的黄酮类化合物举行折柳明白对其进一步的研讨使命起着 指示效率, 同时看待其使用和产物开荒也具有紧张的意旨[6]。郭继芬等[7]选用 Discovery C18 柱,以甲醇-水-甲酸为滚动相,经紫外检测后,正在 ESI 扫描格式下, 对 HPLC-UV 图谱中各色谱峰举行一级和二级质谱明白, 比较品比拟审定了提 取物中 4 个已知的黄酮类化合物,揣度出 3 个未知黄酮苷类化合物或者的机闭。 2/7 Natividad 等[8]采用 LC - MS 法对胶蔷树 Cistus ladanifer L. 叶渗透的树脂进 行明白,折柳审定了芹菜素、4’-甲基芹菜素、7 - 甲基芹菜素、7 ,4 -二甲基 芹菜素、3 -甲基山柰酚、3 ,4’-二甲基山柰酚、3 ,7 -二甲基山柰酚、3 ,7 , 4’-三甲基山柰酚等 8 个黄酮类因素。 2.2 生物碱类 生物碱日常指存正在于生物体内的碱性含氮化合物,大都具有繁复的含氮杂 环,有光学活性和明显的心理效应[9]。生物碱具有抗肿瘤效率的同时,对血汗管 体例、神经体例等均有必然的刺激效率,且还具有必然的抗菌、抗疟效率[10]。 很众生物碱类已被提取折柳,并用作临床调养药物。 Young-Hea Choi 等[11]采用 LC-ESI-MS-MS 法明白了粗榧属植物三尖杉 Cephalotax2us harringtonia 叶中的生物碱 ,折柳审定出三尖杉碱、三尖杉酯碱、 高三尖杉酯碱、异三尖杉酯碱、去氧三尖杉酯碱、去氧三尖杉酸、高去氧三尖杉 酯碱、Cephalezomine C、Cephalezomine E 等 9 个化合物。陈怡等[12] 正在莲子心中 折柳获得 3 种生物碱并做了定量明白和指纹图谱研讨。 2.3 香豆素类 香豆素类是一类具有苯并 α-吡喃酮母核的自然产品的总称。其正在中药中广博 存正在,也具有众种生物活性,如茵陈中的滨蒿内酯具有解痉、利胆的效率,蛇床 子中的蛇床子素可用于杀虫止痒等。孙秀燕等[13]采用 HPLC-MS/MS 联用仪 , ESP-IT-MS 对滨蒿中利胆保肝活性因素举行了折柳和机闭审定 ,审定出滨蒿中 的利胆有用因素除含有绿原酸、对羟基苯乙酮、6 ,7-二甲氧基香豆素。 2.4 萜类 萜类指具有(C5H8)n 通式以及其含氧和差异饱和水平的衍生物,可能当作是由异戊二烯 或异戊烷以各样格式贯串而成的一类自然化合物,是挥发油(又称精油)的重要因素,从植 物的花、果、叶、茎、根中获得有挥发性和香味的油状物。邓亦峰等 [14]采用 HPLCAPCI-MS 联用手艺,以选取离子监测 ( SIM )格式测定了半边旗中二萜类化合 物,该办法可用于半边旗中二萜类抗癌化合物的深切研讨和生药准绳的拟订。 3/7 2.5 甾体类 日常甾体机闭中具有环戊烷骈众氢菲机闭,甾核 C3 位有羟基代替,可与糖 成苷,按照侧链的差异,又分为 C21 甾类、强心苷类、甾体皂苷类和植物甾醇等。 Tai 等[15]用 LC/ESI-MS/MS 研讨了蔓剪草中的 C21 甾体皂苷类,通过裂解 [M+Na]+离子,形成 A、B、C 和 Y 系列的离子,供应了糖链和苷元的机闭音讯, 再辅以高诀别质谱,审定了 8 种 C21 甾体皂苷类。 3 预计 综上所述,HPLC-MS 联用手艺已正在中药化学成昭彰白、中药质料负责、中 药代谢产品审定和中药药物动力学研讨等方面广博使用。HPLC-MS 联用手艺解 决了守旧液相检测器圆活度和选取性不足的舛错,供应了牢靠、正确的相对分子 质料及机闭音讯,简化了试验程序,减削了样品预备时分和明白时分,额外是适 合亲水性强、热不服稳化合物及生物大分子的折柳明白,有着广博的使用前景。 中药及自然产品活性因素及其代谢物正在生物样品中浓度较低,且生物样品内源性 杂质较众,对明白手艺提出了很高的央求。日趋成熟的液-质联用手艺具有圆活 度高、特异性强以及操作方便的上风,HPLC-NMR 等联用手艺的添加,必将正在 中药与自然产品的定量明白、靶药物因素的筛选以及药物代谢物的审定等明白领 域阐述愈来愈弗成代替的效率。 4/7 精选文档 参考文献 [1] 陈娟娟. 液质联用手艺正在药用植物活性物质明白研讨中的使用 [C]. 浙江大学博士学位 论文,2009:4. 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