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硫配糖体

  本创造立异点及好处正在于:采用低沸点的溶剂、索氏抽提从孜然中得到孜然精油,并修筑了柱层析的组分差别本领,将同类型的有机物质实行了分类,本领重现性优异。并用气相色谱-质谱联用仪对组分实行明白判断,确定孜然精油中对食物起到抑菌防腐的首要组分,为自然植物源食物防腐剂的开辟和操纵供应了试验本原和外面凭据。

  用直径5mm的打孔器取空缺比较琼脂片,用细钢丝挑入作育皿内,菌丝面朝下,每个作育皿放2-3个菌种。取菌前打孔器和钢丝酒精灯灼烧消毒。用上述本领,加待测样品,每一菌种做一次空缺比较。然后置于无菌恒温箱内48~72小时后考核。测定菌斑直径,依据空缺,以抑菌圈的直径显露药效。

  针对目前孜然精油提取和有用抗菌组分差别中的技巧难点,本创造的主意正在于供应一种轻便的、低本钱、差别成果高的孜然精油中抗菌组分的差别与纯化本领。

  2、采用柱层析法将上述孜然精油中的饱和烃、清香烃、非烃及胶质四种组分挨次差别;柱层析中的洗脱溶剂为:饱和烃操纵正己烷,清香烃用正己烷/二氯甲烷=1:2(体积比),非烃用二氯甲烷/甲醇=9:1(体积比),胶质用甲醇;哀求饱和烃、清香烃、非烃和胶质四个组分总收率到达85%~100%,低于该值做平等样明白。

  可睹采用石油醚行为溶剂,实行索氏抽提孜然精油的收率高于正己烷溶剂。操纵例1:保鲜试验

  历程抑菌试验创造,差别纯化取得四种组分中芳烃、非烃对百般菌的抑菌后果较显著,能够把二者按必定的比例夹杂行为一种自然防腐剂,平安、无毒且效率时候长,正在食物防腐、肉食保鲜周围有潜正在的操纵代价和扩张操纵的前景。本创造制备的精油组分能够制成颗粒剂、水合剂、乳剂来操纵,也能够同市售调味剂、防腐剂夹杂操纵。

  图1为采用本创造工艺提取的四种组分的离子流图:a-饱和烃、b-芳烃、c-非烃、d-胶质。

  本创造涉及孜然精油中抗菌组分的差别与纯化本领,是一种容易、火速地提取和差别自然植物中有用抗菌组分的新本领,孜然精油行为一种自然食物防腐剂将取得广博的操纵,属自然产品差别提取周围。

  孜然属伞形科草本植物,一名孜然芹、野茴香和安歇茴香等。孜然种子可行为食物的调味品操纵,具有必定的禁止脂质过氧化的效率和护卫去氧核糖的才略。已有的合于孜然挥发油的提取及化学因素咨询中,众采用有机溶剂萃取、水蒸气蒸馏和微波萃取等本领取得孜然精油,并对精油因素实行明白测试,但孜然精油的因素则因萃取本领的差异而分歧较大。提取物因素含量差异使其具有差异水平的生物活性,目前首要咨询的有抗氧化活性、杀菌活性和杀虫活性等。为了普及孜然精油的抗菌后果,需求将个中抗菌组分实行差别与纯化,但因孜然精油中因素繁复,采用目前技巧本事难以将孜然精油差别取得高效抗菌因素,节制了其正在食物周围的扩张操纵。

  1、将孜然种子实行干燥和打破管束,称取孜然粉末,以沸程为30~60℃的石油醚行为溶剂,采用索氏抽提法正在55℃-60℃下浸提,抽提液以无水硫酸钠干燥后,用回旋蒸发仪除去溶剂得到孜然精油;

  以猪、牛、羊鲜肉为试验样品,别离以鲜肉重量的1‰剂量,插手本创造精油差别的有用组分行为保鲜剂,实行只身分试验。结果说明:正在20~25℃前提下,经保鲜剂管束的可以仍旧希奇达5-6天,而不经管束的比较组猪肉经1-2天即陈腐变质,历程保鲜剂管束的样品均较好的拉长了保质期,保鲜后果明显。操纵例2:保鲜比较试验

  外1操纵差异溶剂抽提取得的孜然精油收率及经本创造工艺管束成份含量比较状况;

  所述柱层析的层析柱用吸附剂选Al2O3和硅胶,操纵前均实行活化管束,活化前提别离为:Al2O3正在400℃下活化3-4h,硅胶正在150℃下活化5-6h;装填按Al2O3/硅胶质地比1:1,装填依序是先插手Al2O3,再插手硅胶,填充匀称,插手正己烷润湿柱子。

  柱层析差别取得饱和烃中首要为非极性组分的直链和支链烷烃;芳烃组分首要为含有苯环类的极性组分;非烃类首要为含有杂原子的强极性有机化合物;胶质组分首要为配糖体、油脂和树脂类化合物。从饱/芳比值可知,正在孜然精油中饱和烃组分含量较低,大局部为环状和含杂原子化合物。

  所述柱层析的层析柱用吸附剂选Al2O3和硅胶,操纵前均实行活化管束,活化前提别离为:Al2O3是400℃下活化4h,硅胶是150℃下活化6h;装填按Al2O3/硅胶质地比1:1,装填依序是先插手Al2O3,再插手硅胶,填充匀称,插手正己烷润湿柱子。

  为完成上述主意,通过对孜然精油组分提取及抗菌试验咨询,创造孜然的石油醚提取物中含有对肉类有很好保鲜效率有用因素。

  图3为采用本创造工艺提取的组分对大肠杆菌的抑菌圈照片,图中,a-饱和烃、

  孜然精油与本创造精油差别的有用组分行为保鲜剂比较,二者对鲜肉都具有保鲜效率,其浓度差异,保鲜后果也有差异。当孜然精油与精油差别的有用组分的质地浓度均为50mg/mL时,本创造精油差别的有用组分的保鲜后果更为明显,常温前提下,孜然精油差别的有用组分相对应孜然精油管束后果的保质期拉长2-3天。

  图4为采用本创造工艺提取的组分对酵母菌的抑菌圈照片,图中,a-饱和烃、b-芳烃、c-非烃、d-胶质,e-精油。

  2、采用柱层析将上述孜然精油中的饱和烃、清香烃、非烃及胶质四种组分挨次差别;柱层析中的洗脱溶剂为:饱和烃操纵正己烷,清香烃用正己烷/二氯甲烷=1:2(体积比),非烃用二氯甲烷/甲醇=9:1(体积比),胶质用甲醇;哀求饱和烃、清香烃、非烃和胶质四个组分总收率到达85%~100%,低于该值做平等样明白。

  连结附图2-4,通过对差别取得的四种组分抗菌试验,能够看出孜然精油中具有抑菌后果的组分是清香烃和非烃,个中以清香烃后果较明显。采用色谱-质谱对两种组分定性明白可知,清香烃组分首要为γ-萜品烯、β-蒎烯、α-蒎烯、β-侧柏烯、β-月桂烯、α-水芹烯、枯茗醛、4-萜品醇等化合物;非烃首要含有枯茗酸、枯茗醇等化合物。如将清香烃和非烃以必定比例混配,后果更佳。

  1、开始将市售孜然种子实行干燥和打破管束,然后称取孜然粉末,以沸程为30~60℃的石油醚行为溶剂,采用索氏抽提法正在60℃下浸提,抽提液以无水硫酸钠干燥后,用回旋蒸发仪除去溶剂得到孜然精油;

  图2为采用本创造工艺提取的组分对金黄葡萄球菌的抑菌圈照片,图中,a-饱和烃、b-芳烃、c-非烃、d-胶质。

  测试本领:外面皿离体活性测定法:将200克马铃薯去皮切碎,正在700毫升蒸馏水中煮沸,冷却过滤,滤液与葡萄糖、琼脂夹杂,再加水至900毫升,加热至欢娱,冷却后即得作育基。作育基、蒸馏水、作育皿一块灭菌。

  用电子天平称3mg支配本创造待测样品,加少量DMF熔化,滴加1滴吐温-80,加水配成1000ppm。

  作育基高温减压灭菌15分钟,灭菌后,用刻度试管趁热取10毫升作育基,将其与1毫升,1000ppm溶液稀释到10毫升的本创造待测样品混匀,即制得50ppm的试样,盖好作育皿上盖,程度就寝冷却。


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