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类异戊二烯

  宋文刚;茜草素抗结核分枝杆菌效力机制的卵白质组学磋商[D];吉林大学;2007年

  张伟铮;黄彬;林冬玲;鄂顺梅;薛新娜;曾筑明;陈茶;;结核分枝杆菌本身淬灭探针荧光定量PCR检测手腕的筑筑[J];中邦热带医学;2011年06期

  汪圣强;王柯;裴豪;;主动外排体例与结核分枝杆菌耐药[J];中邦医学工程;2011年07期

  记者 韩晓玲通信员 范敬群 金安江;华中农大磋商效率获天下声誉[N];湖北日报;2009年

  宋心德;IDSA2基因导致结核杆菌出现抗药性[N];医药经济报;2004年

  陈嘉臻;结核分枝杆菌特异的RD2/RD11卵白利用于结核免疫诊断的磋商[D];复旦大学;2009年

  王瑞博;井申荣;;结核分枝杆菌渗透卵白TB10.4的功效和利用[J];性命的化学;2011年04期

  宋宇;结核分枝杆菌MurA的优化外达及功效解析[D];大连医科大学;2010年

  陈士东;;296例结核性脑膜炎临床解析[J];医学外面与实行;2011年13期

  丁卫民;耐众药肺结核与结核分枝杆菌L型沾染的临床磋商[D];山西医科大学;2003年

  王琳;结核分枝杆菌ClpX和ClpP2卵白酶的克隆外达及其性子磋商[D];西南大学;2010年

  记者 黄每裕;珠海推出两种检测试剂新产物[N];中邦医药报;2009年

  曹立雪;利用膜芯片检测结核分枝杆菌rpoB基因突变[D];中邦黎民解放军军事医学科学院;2003年

  刘毅;李卫民;田苗;孙照刚;李传友;周辉;张治邦;高铁杰;岑岭;;迅速筛选界说北京基因型结核分枝杆菌的新手腕[A];2007年中邦防痨协会天下学术会论说文集[C];2007年

  佘茜;结核分枝杆菌PPE68卵白的外达及开始利用[D];重庆医科大学;2011年

  周庆;方中飞;沈小英;宋冰;方孝美;;临床离别结核分枝杆菌的耐药性解析[A];2006年浙江省搜检医学学术年会论文汇编[C];2006年

  张月新;辛毅;马郁芳;;结核分枝杆菌RmlB的外达、纯化及酶促响应动力学磋商[A];2008年天下糖生物学学术会论说文摘要[C];2008年

  蔡溢;结核分枝杆菌RmlA的外达、纯化以及酶促响应动力学磋商[D];大连医科大学;2006年

  吕中全;张明新;张慧;;荧光定量群集酶链响应检测结核分枝杆菌的价钱[J];新乡医学院学报;2011年04期

  金法祥;王华钧;孙小军;;DNA环介导恒温扩增试验检测结核分枝杆菌的磋商[J];中华病院沾染学杂志;2011年12期

  韩喜琴;噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌药物敏锐性磋商及评议[D];北京市结核病胸部肿瘤磋商所;2004年

  黄志强;张日东;吴智龙;陈世浩;;新型更正罗氏培植基与罗氏酸基检测结核分枝杆菌比力[J];广东医学;2011年09期

  王海全;;64例尘肺结核痰结核分枝杆菌培植药敏结果解析[J];中邦医药指南;2011年21期

  钱忠军;华中农大创造新基因希望局限结核病[N];江苏科技报;2009年

  陈军;武汉区域结核分枝杆菌药物敏锐性及氟喹诺酮耐药分子机制的磋商[D];华中科技大学;2011年

  结核病是由结核分枝杆菌惹起的一种吃紧的人类感染性疾病。目前环球生齿中大约1/3的人已沾染结核分枝杆菌,每年约有300万人死于结核。近年来,耐药结核杆菌的涌现,使寻找新型抗结核杆菌的药物势正在必行。2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)途径用于合成异戊酰焦磷酸(IPP)或其异构物,二甲烯丙基焦磷酸(DMAPP),这两者是胞内紧要化合物类异戊二烯合成的合伙前体。MEP途径是细菌成长所必要而人类不存正在的代谢途径,于是成为筛选新型抗菌药物的潜正在靶标。 本文对结核分枝杆菌基因组中编码MEP途径的第三个酶,4-二磷酸胞苷2-C-甲基-D赤藓糖醇(CDP-ME)合成酶基因(ispD/Rv3582c)举行克隆,并外达纯化了该卵白(MtIspD)。通过HPLC和非变性胶电泳解析,讲明具生物活性的MtIspD卵白为同二聚体。酶活解析显示MtIspD是金属酶,Mg~(2+)为最适二价金属离子。手机购彩MtIspD对辅因子底物特异性高,CTP为最适底物。CTP和MEP的Km值分裂为92μM和43μM,Vmax为7.8μmol.min~(-1).mg~(-1),酶单体的转换数为3.4 S~(-1)。MtIspD酶热坚固性差,通过圆二色仪解析差异温度下的二级组织和三级组织,显示三维构象随温度的蜕化与酶活的丢失亲密干系。对MtIspD模筑组织与大肠杆菌结晶组织比力解析,显示MtIspD酶活性位点守旧,酶单体β臂的彼此效力对二聚体变成和酶活性核心变成起合头效力。进一步对酶活核心的三个守旧碱性氨基酸和86位苏氨酸定点突变解析,结果显示K27A,R157A和K215A不只使酶失活,况且影响卵白二级组织和三维构象;86位苏氨酸定点突变(T86S和T86A)申明86位氨基酸羟基对MtIspD酶活有紧要效力。咱们对MtIspD酶活和组织的磋商讲明IspD卵白家族比力守旧,能够以IspD酶活核心筛选和打算广谱抗菌素,而且针对同时参加活性位点和二聚体变成的守旧碱基类似对克制酶活更为有用。咱们的磋商为以该酶行为抗结核杆菌药物靶标筛选克制剂和新型药物奠定了根基。 结核分枝杆菌基因组中ispE基因(Rv1011)编码MEP途径的第四个酶4-二磷酸胞苷2-C-甲基-D赤藓糖醇(CDP-ME)激酶,因为ispE基因稀少分散,但编码卵白务必与催化上下逛举措的单功效IspD/IspF或双功效卵白IspDF彼此效力,本事使MEP途径举行,于是正在MEP途径中起合头效力,所以是紧要的抗结核杆菌药物靶标。然而MEP途径行为候选药物靶标,目前仍无亚细胞定位的实践报道。本文将ispE基因克隆到pET28a载体,正在大肠杆菌BL21(DE3)中外达重组卵白(MtIspE),用Ni-NTA柱亲和层析纯化重组卵白。其纯度和分子量分裂通过SDS-PAGE和高效液相-质谱测定。使用圆二色仪对MtIspE举行二级组织测定,该重组卵白中含有的α螺旋,β折叠,β转角和无法规卷曲分裂为36.3%,26.9%,11.8%和25.1%。MtIspE酶活解析开始需制备CDP-ME底物,由上逛重组卵白MtIspD催化CTP和MEP变成,经高效液相/质谱联用纯化和解析产品,证据得回有用的CDP-ME。酶活测定双底物ATP和CDP-ME的Km值,分裂为213μM and 317μM,Vmax为0.413μmol.min~(-1).mg~(-1),酶单体的转换数为0.23 S~(-1)。咱们用MtIspE免疫清楚兔得回高滴度的众克隆抗体,通过RT-PCR和卵白印迹解析,申明结核分枝杆菌对数成长期确实外达IspE卵白,该卵白厉重正在结核分枝杆菌胞浆阐扬最用。通过对MtIspE酶学解析和正在结核分枝杆菌亚细胞定位的磋商,将为筛选和化装抗MtIspE的新型抗结核药物有肯定的助助。

  戴广明;曹以诚;杜正平;陈洵;黄曙海;逄宇;周杨;黄海荣;赵雁林;;结核分枝杆菌环介导恒温扩增(LAMP)迅速检测手腕的修建[A];中华医学会结核病学分会2010年学术年会论文汇编[C];2010年

  刘焰;刘胜武;叙蓉;马立新;刘君炎;;结核分枝杆菌Ag85B与ESAT-6双顺反子重组腺外达载体的修建[A];第六届天下免疫学学术大会论文集[C];2008年

  吴玉敏;1.结核分枝杆菌去标签Mtb8.4-Hspx和Hspx-Mtb8.4基因克隆及外达 2.FTY720对肾移植受者医治的安然性和有用性体例评议[D];兰州大学;2010年

  申峻松;结核分枝杆菌lhp基因的原核外达及其产品的单克隆抗体研制[D];扬州大学;2008年

  许优;孙惠平;张增贤;刘莉娜;;合于结核分枝杆菌定量手腕的磋商[A];中华医学会结核病学分会2006年学术会论说文汇编[C];2006年

  陈涛;周琳;周杰;江勇;周志刚;彭筑明;文力;彭东东;何超文;钟球;;环介导等温扩增法迅速检测结核分枝杆菌的手腕筑筑与临床利用评估[A];中华医学会结核病学分会2011年学术会论说文汇编[C];2011年

  陈军;武汉区域结核分枝杆菌药物敏锐性及氟喹诺酮耐药分子机制磋商[D];华中科技大学;2011年

  吴园;钟敏;王易伟;钟静;胡再三;毛旭虎;;Rv0341用于诊断依赖利福平结核分枝杆菌结核病的磋商概略[A];中邦防痨协会临床委员会、中邦防痨协会根基委员会学术研讨会论文集[C];2008年

  张旭霞;张海青;李传友;田苗;赵冰;李卫民;张健源;印云青;焦扬;端木宏谨;;结核分枝杆菌黏附素HBHA防治结核病的动物实践磋商[A];2005年中邦防痨协会天下学术会论说文集[C];2005年

  廖传玉;黄正谷;陈天刚;李齐心;万东勇;饶霞;徐艳;侯毅;钟敏;厉哓峰;;2004~2009年我核心结核分枝杆菌临床株耐药趋向[J];临床肺科杂志;2011年08期

  王霞芳;IFN-γ加强BALB/c小鼠对结核分枝杆菌沾染的抵拒力[D];姑苏大学;2002年

  刘凯;结核分枝杆菌藏匿沾染者和初发结核病患者免疫分子标识的筛选[D];北京协和医学院;2010年

  驻鄂记者 钱忠军通信员 金安江 范敬群;创造或许局限结核病的新基因[N];文报告;2009年

  孙勇;北京区域结核分枝杆菌耐药分子特色及结核分枝杆菌耐喹诺酮类药物泵机制的开始磋商[D];北京市结核病胸部肿瘤磋商所;2012年

  记者 项铮;团山聚会研讨罕睹病原体防治政策[N];科技日报;2009年

  董海燕;中邦13省市结核分枝杆菌基因众态性解析[D];中邦疾病注意局限核心;2011年

  陈曦;张宗德;刘忠泉;贾红彦;邢爱英;古书香;;结核分枝杆菌rv3873、rv3879c基因原核外达载体的修建和外达[A];中华医学会结核病学分会2006年学术会论说文汇编[C];2006年

  董海燕;张筑中;万康林;;结核分枝杆菌毒力干系因子磋商进步[J];医学磋商杂志;2011年06期

  施文钧;结核分枝杆菌类异戊二烯合成途径中IspD和IspE酶学功效磋商[D];复旦大学;2007年

  王平;肺分枝杆菌沾染临床特性、耐药形式、预后磋商及肺结构结核分枝杆菌巢式PCR检测[D];北京协和医学院;2011年


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